本发明公开了一种兼具类氧化酶和过氧化物酶性质的铁纳米酶的制备方法及其应用。本发明利用硫酸多糖的角叉菜聚糖(CG)和单宁酸(TA)对铁的螯合作用，以天然多糖CG为载体制备铁氧化物，用TA调节铁螯合程度，形成TA‑铁‑多糖复合物，最后通过加入NaOH的共沉淀法原位形成铁氧化物(Fe@TA@CG)。该铁氧化物同时具有氧化酶和过氧化物酶的性质并且在pH向中性移动后保留较多的活性。基于铁氧化物的氧化酶活性建立了抗坏血酸及总抗氧化能力的检测方法，操作方便，可用于日常检测，具有较好应用前景。