本发明公开了一种农用生物刺激素制剂及其制备方法和应用，该农用生物刺激素制剂包括以下组分(按重量百分比计)制成：海鲜菇副产物的水提取物5％～50％，百里香酚1％～20％，吐温0.5％～10％，乙酸乙酯1％～10％，水2％～80％。本发明农用生物刺激素制剂中百里香酚市场上供应充足，容易获取，利用海鲜菇菌根和/或海鲜菇菌柄的水提取物是对农产品副产物的资源化再利用，且对环境安全。本发明农用生物刺激素制剂适用于绿色和有机农产品生产，经济效益和社会效益显著，应用前景广阔。将本发明生物刺激素制剂对青菜进行叶面喷施，可显著提高青菜产量和品质。