本发明涉及了一种用于膝沟藻毒素检测的电化学适体传感器制备方法，包括以下步骤：采用水热合成法制备双贵金属纳米粒子/多金属氧酸盐/功能化三维碳纳米复合材料，自行设计桥型DNA共聚物采用共价键合方式结合在薄膜金电极上制备得信号分子b/桥型DNA共聚物/双贵金属纳米粒子/多金属氧酸盐/功能化三维碳纳米复合材料/薄膜金电极，采用铂丝电极为对电极，饱和氯化银作为参比电极，通过信号分子a和信号分子b的响应信号的增加指示样品中膝沟藻毒素的含量，得到了用于膝沟藻毒素检测的双信号电化学适体传感器。本发明与传统膝沟藻毒素检测方法相比，具有响应速度快、检测限低、灵敏度高、重复性好、准确度高的优点。