本发明提供了一种胶体金免疫层析分析仪的检测方法，胶体金免疫层析分析仪包括胶体金免疫层析试纸条、第一传感器、第二传感器、第三传感器、第一发光器件、第二发光器件及控制器；胶体金免疫层析试纸条包括加液区及对待测物进行检测的检测区，检测区包括测试线、空白区域及控制线；第一发光器件照射测试线和空白区域；第二发光器件照射空白区域和控制线；第一传感器、第二传感器和第三传感器用于对应获取测试线、空白区域和控制线的光子数量；控制器控制第一发光器件和第二发光器件的发光时间，使在将待测物滴入加液区前，测试线和控制线的光子数量差值小于预设光子数量差值。本发明实现了测试线和控制线的照度平衡，提高了检测准确性。