本发明涉及天然药物技术领域，具体涉及开口箭根茎中一类呋甾烷醇型甾体皂苷类化合物及其分离制备方法和用途。本发明通过对药用植物开口箭的甲醇回流粗提物进行分离纯化，得到2种新的呋甾烷醇型甾体皂苷类化合物。分子对接实验证明这2种化合物与iNOS、COX‑2、HSP90和GR具有较好的结合活性，可能成为iNOS、COX‑2、HSP90、GR的潜在抑制剂。本发明的方法相对简单且具有较好的实用价值，同时为继续从开口箭中发现此类成分起到借鉴作用，对开口箭的综合开发和应用有着重要的意义。