本发明属于生物技术领域，公开了一种蒙古鲌卵母细胞冷冻保存的方法，步骤包括：(1)分散后的蒙古鲌卵母细胞先后在平衡液一和平衡液二中，分别平衡8‑12min；(2)转移到冷冻保护剂中，分装至冻存容器，插入液氮保存。本方法使用多种溶剂和抗氧化剂褪黑素配制冷冻保存液，将抗冻保护剂与含KCl的稀释液混合，形成用于卵母细胞冷冻保存过程中的平衡液一和平衡液二。本方法可降低细胞受到的毒性损伤、氧化损伤和机械损伤；同时采用麦管作为冷冻保存容器，降低了卵母细胞冷冻保存的成本和操作难度，提升了卵母细胞的冷冻保存效率，实现了卵母细胞的长时间保存，适用于鱼类种质保存的生产需要。