本发明属于益生菌技术领域，具体为肠乳杆菌ATCC 49335在治疗结直肠癌药品制备中的应用。本发明通过肠乳杆菌ATCC 49335能够活化肿瘤细胞NOD1受体，增加CCL5分泌以提高肿瘤树突状细胞等免疫细胞浸润，同时增加肿瘤浸润CD8+T细胞活化指标CD69的表达水平，减轻AOM/DSS炎性结肠癌模型、APCmin/+自发性结肠癌模型的肿瘤负担。本发明通过肠乳杆菌ATCC 49335改善肿瘤免疫微环境，具有显著抑制结直肠癌发生发展的作用，可作为益生菌治疗手段的有益补充。