本发明涉及一种聚氨基酸基原位软骨再生多孔凝胶支架及其制备方法。将苯硼酸酯与聚乙二醇改性Kartogenin酯化相连得到苯硼酸酯改性的PEGKGN；将硼酸酯改性的PEGKGN与烯丙基聚乙二醇共同接枝至聚氨基酸侧链得到接枝共聚物PLBPKA，将接枝共聚物PLBPKA与Kartogenin小分子以及丝素蛋白溶液共混，在剪切力作用下形成载药自组装网络，最终通过紫外光交联与冷冻相分离构建得到聚氨基酸基原位软骨再生多孔凝胶支架，其为一种差异化释药水凝胶支架。与现有技术相比，本发明支架具有良好的生物相容性和生物可控降解性，并且在炎症环境中加能够速释放药物，促进干细胞迁移；而在正常生理环境中缓慢释放药物，促进干细胞软骨向分化。因此能够在无外源性干细胞的情况下，促进关节软骨的原位再生。