本发明公开了一种地熊蜂成虫胃毒的毒力测定装置及使用方法，包括上下分布的蜂箱、污物收集皿和糖水饲喂器，所述蜂箱由正面板、背面板、右面板、左面板、底板和顶板拼接而成。本发明蜂箱的正面和顶面箱板采用高透明的材料，方便在实验时观察箱内情况；蜂箱顶板与箱体采用滑动连接设计，可自由选择蜂箱开口大小，可有效防止地熊蜂逃逸，保障操作人员的安全；蜂箱可拆卸且拆装简便，方便运输与贮藏以及清洗；蜂箱上设计有专门的糖水饲喂孔和药剂饲喂孔，更加方便饲喂糖水和药剂以及测定药剂消耗量，省时省力；污物收集皿的设计可有效保证蜂的干爽生活环境以及实验过程的卫生整洁；糖水饲喂器侧面放置有利于整个蜂箱的堆叠从而节约实验空间。