本发明涉及一种三七愈伤组织培养及其毛状根诱导方法，属于植物组培技术领域。该方法包括外植体的处理、愈伤组织诱导培养、菌液制备和共培养几大步骤。以ArA4载体的农杆菌作为毛状根诱导的菌株，以选择三七茎杆诱导产生且培养得到的绿色胚性愈伤组织为研究对象，通过遗传转化试验，经50‑60d时间的试验，诱导出的三七根状植物组织，PCR验证确定本试验诱导出的三七根状植物组织，即为以ArA4菌株通过遗传转化诱导出的三七毛状根。本发明所获得的结果为三七基因功能验证，即三七皂苷合成通路探究提供试验基础和理论依据。