本发明涉及油气地质勘探技术领域，特别是涉及一种基于C26降胆甾烷判识陆相湖盆油源的方法。所述方法包括以下步骤：选取已知油源且远离断裂带的岩性油藏中原油作为端元油样品，对端元油样品进行筛选及类型划分；对端元原油样品中C26降胆甾烷、C26重排降胆甾烷以及C30甲基甾烷系列化合物进行检测；建立原油判识图版；对待测原油样品中C26降胆甾烷、C26重排降胆甾烷以及C30甲基甾烷系列化合物进行检测，结合原油判识图版对待测原油样品来源进行判识。本发明方法解决了由于成藏过程或次生作用导致常规对比参数存在多解性而无法准确进行油源对比的难题，能够为油气目标评价及资源潜力分析提供准确依据。