本发明涉及人类辅助生殖领域。本发明提供了一种精子洗涤液及其制备方法，该精子洗涤液以水为溶剂，包括以下组分：氯化镁、亚硒酸钠、碳酸氢钠、磷酸二氢钠、氯化钾、羟乙基哌嗪乙磺酸、泛酸钙、维生素E、维生素C、乳酸钠、葡萄糖、谷胱甘肽、人血清白蛋白以及庆大霉素。本发明制备的精子洗涤液不仅能够为精子发育提供必要和直接的营养物质，为精子运动提供能量物质，增强精子活力，使精子更加活跃，从而提高受精的机会；同时还能提高精子的总抗氧化能力，更好的维持渗透压和pH稳定。