本发明公开了一种羊毛硫肽类抗菌肽，其结构为：核心肽‑羊毛硫肽基因簇，所述羊毛硫肽基因簇前和基因簇之间插入核糖体结合位点序列，所述核心肽的核苷酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.1的保守替代序列所示。本发明使用的枯草芽孢杆菌对培养基的要求比较简单，在生产中绝对占有经济优势，噬菌体、质粒都可作为克隆载体，并且，提供的羊毛硫肽具有显著的抑菌活性，可应用于医药、医疗等抗生素替代领域，与现有抗生素相比，其抑菌活性高，制备成本低，具有较好的应用前景。