本发明公开了一种佛手山药试管微块茎高效生产工艺，包括取佛手山药茎蔓顶端的幼嫩茎段，茎段用清水冲洗后，用75%酒精和1%升汞消毒，将茎段切成小段转接至不定芽诱导培养基中，切取不定芽转至不同碳源、不同浓度配比的2,4‑D、6‑BA和NAA的培养基上，形成佛手山药试管微块茎。该佛手山药试管微块茎高效生产工艺通过研究不同碳源种类与浓度对佛手山药试管微块茎形成和生长的影响、不同植物生长调节剂种类与浓度配比对佛手山药形成试管微块茎的影响，建立了佛手山药试管微块茎高效生产工艺，提高微块茎的形成率和产量，保障了佛手山药种源的优良品质，促进佛手山药产业的健康持续发展。