本发明提供了一种动物源性食品的兴奋剂检测样品配置方法，以及一种动物源性食品中兴奋剂的检测方法。通过本发明动物源性食品兴奋剂检测样品的配置方法，不同动物食品样品中兴奋剂均能被完全提取，且避免了样品溶液在检测时的基质效应，解决了现有技术中兴奋剂不能从动物制品中完全无损失的提取出，以及检测样品杂质的干扰。本发明动物源性食品中兴奋剂的检测方法，兼顾了测定不同动物食品的兴奋剂含量，具有较好的通用性和专属性，灵敏度高，操作方便，分析时间适中，为动物源性食品中兴奋剂含量准确检测提供了有效保障，保证了运动员饮食安全。