本发明属于基因工程及植物育种技术领域，公开了一种菠萝AcPLD2基因超表达载体的构建和应用。所述超表达载体的构建方法为：采用特异性引物AcPLD2‑F和AcPLD2‑R进行PCR反应，扩增得到AcPLD2基因片段；将AcPLD2基因片段克隆至含CaMV 35S启动子的PHB载体，得到菠萝AcPLD2基因超表达载体PHB‑AcPLD2。并采用异源转化，将AcPLD2基因在拟南芥野生型和pld2突变体中超表达来验证AcPLD2基因是否参与膜脂代谢，具有载体构建方法简单，验证结果可靠的优点。本发明首次明确了AcPLD2基因参与膜脂降解的功能，研究也为菠萝的分子育种和遗传改良提供了一种新的途径。