本发明涉及基因工程技术领域，涉及一种高效制备可溶性RNA酶抑制剂的工艺，所述工艺包括：(1)构建重组表达载体，所述表达载体为利用大肠杆菌质粒插入RI基因得到重组的大肠杆菌表达质粒；(2)培养表达，将所述重组后的大肠杆菌质粒转化至大肠杆菌蛋白表达感受态细胞中获得阳性克隆，再将所述阳性克隆于生长诱导培养基上进行诱导表达，待OD值为2.0～2.5时进行诱导，诱导剂为异丙基硫代半乳糖；(3)收集并纯化获得目的蛋白。本发明的工艺缩短了生产周期，节约了生产成本，经济性好，产量高。