本发明涉及病理实验工具的技术领域，具体涉及一种用于免疫组化笔的笔液及其制备方法，按照重量百分数计包括：15％～30％的马尾松树脂、5％～26％的丙三醇、0.1％～1.0％的聚己内酯、0.1％～0.3％的山嵛酸甘油酯，余量为溶剂，所有组分之和为100％。本发明的用于免疫组化笔的笔液的疏水性好，可以更好地将试剂锁定在所画圈内，避免试剂流失，节约成本。本发明的用于免疫组化笔的笔液的原料毒性低，刺激性气味小，更环保更安全；且原料较易获得、成本较低。采用本发明的用于免疫组化笔的笔液的免疫组化笔所画的疏水圈更牢固的粘着在玻片上，不容易被清洗液洗掉，也不易被摩擦掉，避免多次洗涤、擦片后重复画圈。