本发明涉及路面材料技术领域，提供了一种生物基再生沥青用改性剂及其制备方法和应用。本发明提供的生物基再生沥青用改性剂包括A组分和B组分；A组分包括生物基环氧化合物70～90份、稀释剂10～30份、附着力促进剂0.5～1.5份；B组分包括固化促进剂1～6份、固化剂10～40份、稀释剂60～85份。本发明提供的生物基再生沥青用改性剂在对沥青进行再生的同时,能够起到良好的增强作用，有效提升再生沥青混合料的高温性能、低温性能和耐久性，保障再生沥青的路用性能和品质稳定性。并且，本发明所用的主要原料为生物基材料，未使用挥发性有毒或易燃溶剂，对环境及施工人员友好。