本发明提供了一种蒙古冰草的遗传转化方法，包括如下步骤：步骤一、对蒙古冰草的外植体进行诱导形成愈伤组织，将愈伤组织进行继代和分化培养，获得转化受体；步骤二、对步骤一获得的转化受体用农杆菌侵染液进行一次侵染；步骤三、对步骤二侵染后的转化受体进行暗培养筛选，筛选后采用农杆菌侵染液进行二次侵染；步骤四、对完成侵染的转化受体进行共培养，确定侵染效果。本申请设计并成功建立了蒙古冰草的遗传转化体系，将易侵染基因型蒙古冰草的侵染效率由不足5％提高到80％以上，并且在暗培养筛选2个月后，转入的目的基因仍能稳定的在蒙古冰草愈伤组织中表达，为蒙古冰草的分子育种研发提供了新方法。