本发明公开了一种真菌固定化材料及其制备方法和应用，属于真菌固定化材料技术领域。所述真菌固定化材料以聚乙烯醇、海藻酸钠、生物质炭和吐温‑80为壁材，具有红霉素降解功能的真菌孢子悬液为芯材，通过交联反应得到。本发明制备的真菌固定化材料操作简便，成本较低，利于后期的实际应用，相较于游离真菌，对红霉素废水具有更高的降解率、稳定性及循环使用能力，循环使用6次后依然可以保持60％以上的降解率，具有良好的应用前景，且应用于环境中红霉素污染修复的安全风险较低，可以避免耐药基因传播和超级细菌产生的潜在风险，也为其他大环内酯类抗生素的污染治理提供了一种新思路。