一种具有竞争活性的ILTV单克隆抗体及其应用，属于生物抗体技术领域。为解决现有ILTV抗体检测方法存在的缺陷，且现有的ILTV单克隆抗体与ILTV多克隆抗体无竞争活性等技术问题，本发明选取经蔗糖密度梯度纯化后灭活的ILTV‑LJS09株作为免疫原对小鼠进行免疫，经细胞融合、筛选和亚克隆，获得了杂交瘤细胞株8H3及由该杂交瘤细胞株分泌的具有竞争活性的抗ILTV gJ蛋白构象表位的单克隆抗体。本发明得到的单克隆抗体具有与ILTV多克隆抗体竞争结合ILTV的特异性，适用于免疫学检测，包括间接免疫荧光、免疫组化和夹心ELISA等抗原检测，尤其是竞争ELISA检测ILTV抗体，具有广阔应用前景。