本发明涉及一种自组装纳米纤维素的制备方法，将硝化纤维素与硫化钠或硫化氢钠溶液混合均匀，置于恒温下进行搅拌反应；反应温度为40～60℃，反应时间0.5～1.5h；将反应后的产物取出，在室温下快速离心，然后超声分散于去离子水中，离心分离，循环多次，直至上清液至中性，得到的沉淀加入适量去离子水超声分散所得产物为纳米纤维素分散液。该方法工艺简便、反应时间短，易于控制、能耗低，制得的产品为纳米微球状、粒径小、结构可控且含有疏水基团。