本发明涉及油气井井下作业技术领域，尤其涉及一种卡层测试封隔装置及管柱，旨在解决现有封隔器在水平井测试时坐封效果差或坐封失败的问题。本发明提供的卡层测试封隔装置包括提放坐封封隔器和自密封型封隔器；提放坐封封隔器包括中心管、活动套、锚定机构、第一蓄能机构和第一密封机构；第一密封机构受第一蓄能机构挤压后膨胀并抵接于井筒内壁；自密封型封隔器包括上芯轴、下芯轴、第二蓄能机构和第二密封机构；第二密封机构受第二蓄能机构挤压后膨胀并抵接于井筒内壁。本发明通过分别通过第一蓄能机构和第二蓄能机构的驱动实现可靠坐封，将两个封隔器之间的层分隔出来，从而可将水平井将任意一层分隔并进行试油测试。