本发明涉及一种抗HIV‑1gp120的单克隆抗体或其抗原结合片段及其应用。该抗体包含重链可变区和轻链可变区，其中重链可变区包含：SEQ ID NO.1的氨基酸序列所示的CDR‑H1、SEQ ID NO.2的氨基酸序列所示的CDR‑H2以及SEQ ID NO.3的氨基酸序列所示的CDR‑H3；轻链可变区包含：SEQ ID NO.5的氨基酸序列所示的CDR‑L1、具有氨基酸序列KAS的CDR‑L2以及SEQ ID NO.6的氨基酸序列所示的CDR‑L3。本发明制备的抗HIV‑1gp120的单克隆抗体对HIV‑1gp120具有较强亲和性、反应活性和特异性，可为HIV‑1gp120感染的检测和研究提供有力的工具。