本发明公开了一种输液港穿刺定位装置，属于医疗器械技术领域，包括：定位环，所述定位环的外部开设有进出缺口，所述定位环的内圈侧壁固定连接有两个导向板，所述定位环的内部开设有负压空腔，所述定位环的外部连通有阀门，所述阀门远离定位环的一端插接有第一插接管，当医护人员整体将定位环配合压板按压到人体皮肤上时，医护人员可以通过将阀门连接第一插接管，并通过持续挤压球囊配合出气管和第一插接管将定位环内部负压空腔中的空气抽出，使得负压空腔内部形成负压从而持续吸附在人体皮肤上，当负压空腔内部形成负压持续吸附在人体皮肤上后，可以短暂解放医护人员的双手从而更加方便的进行穿刺工作，减少按压力不足导致的错位现象。