本发明公开了一种非诊断目的的非洲猪瘟病毒抗体检测方法，步骤为：在96孔板中用微生物保藏编号为CCTCC NO:V202404的非洲猪瘟病毒毒株感染微生物保藏编号为CCTCC NO:C2022258的野猪肾细胞，将感染的细胞在96孔板的孔内固定，将待检血清添加到96孔板中，将HRP标记的重组葡萄球菌蛋白A添加到孔中，将AEC显色液添加到孔中，清洗96孔板，用普通光学显微镜观察96孔板，根据是否能够观察到红棕色着染细胞判定血清中是否含有非洲猪瘟病毒抗体。本发明还公开了用于前述检测方法的病毒株与试剂盒。该方法敏感度高，安全性好，特异性好，操作方便，可推广应用。