本发明属于基因编辑领域，具体涉及一种单碱基编辑ALS和ACC基因的玉米种质的创制方法。本发明利用nCas9融合deaminase和UGI及nCas9融合TadA构建得到玉米胞嘧啶和腺嘌呤碱基编辑器。构建靶向Zm ALS或Zm ACC活性位点的胞嘧啶碱基编辑载体，农杆菌侵染法转化磺酰脲类除草剂敏感的骨干自交系茎尖或幼胚，得到无转基因的纯合单碱基编辑阳性植株。并通过对T1代单碱基编辑阳性植株进行除草剂处理实验，证实与野生型B104相比，单碱基突变使得自交系玉米材料具有较强的除草剂耐性，降低了其对磺酰脲类（SU）除草剂的敏感性，对玉米耐除草剂新品种的选育提供了可行性依据。