本发明涉及纳米材料技术领域，具体涉及一种纳米二氧化硅‑蛋白质缀合物及制备方法，制备方法为：S1、纳米二氧化硅表面巯基改性；S2、氨基与二硫键引入；S3、将蛋白质缀合到二氧化硅纳米粒子表面。该方法通过先对二氧化硅纳米粒子进行表面巯基基改性，再通过与含有氨基和二硫吡啶基团的小分子进行反应在纳米二氧化硅表面引入氨基和二硫基团，最后通过与含有游离羧基和巯基的蛋白质进行反应生成二氧化硅‑蛋白质缀合物。本发明所述制备方法制得的纳米二氧化硅‑蛋白质缀合物不仅分散性性好，而且蛋白质缀合量高，生物相容性、生物催化性方面具有显著优势。