本发明涉及化学分析定性检测技术领域，尤其涉及人源血管性血友病因子特征多肽组及其应用。所述特征多肽组由特征多肽1、特征多肽2、特征多肽3和特征多肽4组成，具体的氨基酸序列为：特征多肽1氨基酸序列为VIVIPVGIGPHANLK，特征多肽2氨基酸序列为ITLLLMASQEPQR，特征多肽3氨基酸序列为LTQVSVLQYGSITTIDVPWNVVPEK，特征多肽4氨基酸序列为FNHLGHIFTFTPQNNEFQLQLSPK。该特征多肽组可用于人凝血因子VIII中血管性血友病因子特征肽种属来源填补了人凝血因子VIII中血管性血友病因子质量标准的空白，检测准确度高，确保血管性血友病因子产品临床用药的有效性和安全性。