本发明公开了牛病毒性腹泻病毒易感单克隆细胞株及制备方法与应用，属于生物医学技术领域。本发明通过筛选获得一种牛病毒性腹泻病毒易感单克隆细胞株，解决了目前MDBK‑野生型细胞株培养的BVDV病毒的复制滴度有限，生产效率低，成本较高的问题。所述牛病毒性腹泻病毒易感单克隆细胞株命名为牛源肾脏传代细胞系MDBK‑C14，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.45823，保藏时间为2024年3月4日。本发明所述的牛病毒性腹泻病毒易感单克隆细胞株能够大幅度提高牛病毒性腹泻病毒的复制滴度，可应用于牛病毒性腹泻病毒疫苗种毒生产，从而降低成本。