本发明提供一种Lars2基因缺失的线粒体肌病小鼠模型构建方法及其应用，第一Lars2flox/flox小鼠通过与Acta1ER‑Cre小鼠杂交，获得Acta1ER‑Cre‑Lars2flox/flox小鼠；第二步：上述小鼠到达4周龄时使用他莫昔芬70‑80mg/kg连续腹腔注射5天；第三步：4周后再次使用他莫昔芬45‑55mg/kg连续腹腔注射5天；第四步：Acta1ER‑Cre‑Lars2flox/flox小鼠到达12‑13周龄即出现骨骼肌Lars2蛋白缺失，16周可明显发生骨骼肌萎缩，获得Lars2基因缺失的线粒体肌病小鼠模型。