本发明属于基因工程和蛋白质工程技术领域，具体涉及一种重组Ⅳ型人源化胶原蛋白及其编码基因和应用。本发明以人Ⅳ型胶原蛋白α4链氨基酸序列为基础，利用生物信息学等手段对氨基酸序列进行设计，得到一段含有281个氨基酸的全新胶原蛋白序列，使重组Ⅳ型人源化胶原蛋白在维持高生物活性的前提下，实现更高表达和高稳定性，且该氨基酸序列源于天然人Ⅳ型胶原蛋白，应用于人体生物相容性好，不会产生不良反应。且蛋白产量高，纯度高，收率高，为工业化大规模生产奠定了基础，因此具有良好的实际应用之价值。