本发明涉及一种侧链含有三级胺的聚类肽及其制备方法与应用，属聚类肽技术领域。本发明的侧链含有三级胺的聚类肽的结构为#imgabs0#其中，n＝25‑400，n为整数；R选自#imgabs1##imgabs2#本发明的聚类肽具有与蛋白质类似的骨架结构，生物相容性好。聚类肽的叔胺侧基可形成阳离子季铵而与带负电荷的基因进行静电相互作用形成复合物，提高基因对核酸酶的稳定性。而且复合物的形成中和了基因表面的负电荷，减少其与细胞表面负电荷的相互排斥作用，有利于其进入细胞进行转染。此外，叔胺基团具有pH响应性，有利于基因复合物进行溶酶体逃逸而进入细胞质和细胞核，实现转染。