本发明提供一种除草剂组合物及其在防除天然草原毒草中的应用。除草剂组合物由以下组分组成：2,4‑滴二甲胺盐，氨氯·二氯和助剂，助剂为“迈丝”植物油增效剂或飞防专用助剂“迈飛”。天然草原毒草包括豆科毒草、狼毒属毒草、棘豆属毒草和橐吾属毒草。本发明的除草剂组合物具有激素选择性和内吸传导作用、作用速度快、防效高、对禾本科和莎草科优质牧草安全，用药量少、成本低、对环境友好，克服了现有技术中防除毒草需要使用我国限用或禁用的含有有毒有机溶剂二甲苯、因高挥发性导致飘移药害严重的2,4‑滴丁酯乳油的缺陷，弥补了现有专利一种除草剂组合物只能防除1种毒草的不足，填补了因药液未添加喷雾助剂而致除草剂利用率低的短板。