本发明属于生物领域，具体涉及一种伪狂犬病病毒湿毒保存方法，向伪狂犬病病毒湿毒中加入保护剂和pH缓冲剂，得到病毒溶液，所述病毒溶液于0～8℃保存；每100ml病毒溶液中含0.7g~0.8g明胶、1g~3g蔗糖和/或海藻糖、0.5g~1.5g甘露醇和/或山梨醇。该方法于0℃或以上保存伪狂犬病病毒湿毒，使其病毒滴度在一定时间内基本保持不变，解决了伪狂犬病病毒在常规方法冷冻保存下病毒活力持续大幅度降低的问题，以利于后期冻干疫苗的生产，本发明还提供上述方法的用途。