一种培育高核黄素黑木耳的栽培料的制备方法，属于高核黄素黑木耳菌种育种培育技术领域，是以杭白菊、银杏叶、甘草、松果和核桃壳粉碎混合成混合粉末1，加入糠壳、玉米粉和蔗糖粉混合形成混合粉末2，灭菌后采用阿拉伯糖醇汉逊酵母（Hansenula arabitolgenes）、乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）和地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）进行发酵制备发酵物，在发酵物中加入椴木屑、生石灰、石膏粉和纯化水制得栽培料。本发明制备的栽培料有效提高了黑木耳中核黄素含量，达到了2mg/100g干耳以上，缩短黑木耳培育周期，同时显著提高了黑木耳的产量，干耳产量达到了120g/袋以上，以上栽培方法，可用于对高核黄素黑木耳菌种的种苗培育，通过该栽培料培育获得高核黄素黑木耳的高品质菌种。