本发明属于生物技术领域，具体涉及一种小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株及其构建方法和应用。针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种具有优异放疗抵抗特性的小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗细胞株MOC1‑R，保藏于中国微生物菌种保藏管理中心CGMCC，保藏号CGMCC No.45842；它是由小鼠口腔鳞状细胞癌细胞株MOC1经多次X射线累积辐照和培养后获得的放疗抵抗细胞株，放射抵抗性强，在小鼠口腔鳞状细胞癌放疗抵抗机制的细胞模型中具有良好应用前景。