本发明提供一种桑叶多靶向提取工艺、提取物及其应用，属于中药提取分离技术领域。桑叶多靶向提取工艺包括以下步骤：（1）将桑叶粉碎、过筛，得到桑叶粉；（2）将桑叶粉用酸‑乙醇溶液提取，得到提取液；（3）提取液浓缩得到含有1‑脱氧野尻霉素（DNJ）和黄酮（Flavone）的提取物；其中所述酸‑乙醇溶液的pH值为1.5‑2.5。通过对提取条件：包括pH值、乙醇浓度、提取温度、料液比、提取时间的优化，使桑叶提取物中DNJ和Flavone的质量比为1：5‑6时体外降糖活性明显增强，同时提取工艺不使用有机试剂，无毒、环保，适合工业生产。