本发明涉及生物技术领域，具体涉及拉沙病毒包膜糖蛋白GP突变体及其在制备拉沙疫苗中的应用。本发明的拉沙病毒包膜糖蛋白GP突变体是在序列如SEQ ID NO.1所示的野生型LASV GP全长序列上进行氨基酸突变修饰获得，获得的拉沙病毒包膜糖蛋白GP突变体的编码基因序列如SEQ ID NO.11或SEQ ID NO.12所示，并分别插入真核表达载体得到2种质粒抗原PF‑ND4和PF‑ND4‑R4，本发明检测了小鼠引流淋巴结生发中心的形成，T细胞免疫应答和血清中和抗体活性，结果显示在融合前构象基础上进行4个糖基化位点突变的设计策略可诱导体液免疫应答和中和抗体。本发明为拉沙热的防治提供了新的策略。