本发明公开了属于材料分析与制备技术范围的一种以微乳液作为溶剂的逆流色谱分析和分离制备方法。实施步骤为：针对被分离样品，选择相应的含微乳液的液液两相溶剂，按比例配置两相溶剂；将含微乳液的液液两相溶剂中的一相作为逆流色谱中的固定相，将另外一个液相作为流动相，在逆流色谱中进行被分离物质的分析、分离、制备或提纯。本发明将逆流色谱和微乳液溶剂有机地结合起来，将微乳液体系和逆流色谱技术两者的优势结合在一起，大大地提高了分离效率，有效地扩大了逆流色谱的使用范围，本分离制备过程能连续进行，操作简便，并可广泛应用于金属离子、有机物质、天然物质和生物分子的分析和分离制备等领域。