本发明提供一种聚阳离子脂质体端粒酶反义寡核苷酸复合物，由聚阳离子脂质体和反义寡核苷酸组成。以低分子量PEI和酰氯胆固醇(Cl-Chol)为原料，合成两亲性产物PEI-Chol。以磷脂、PEI-Chol和胆固醇为膜材，用薄膜分散法或逆相蒸发法制备聚阳离子脂质体。本发明提供的复合物能够显著提高细胞摄取anti-hTERT，比PEI-Chol具有更高的抑制端粒酶活性的作用；对肿瘤细胞的抑制率比阳离子聚合物高，毒性比阳离子脂质体小，本发明提供的复合物的制备方法设计合理，具有制备工艺简单优点，有广阔的应用前景。