轮状病毒Vp6基因与乳酸菌非抗性表达载体的重组与表达
摘要:
一种轮状病毒Vp6基因与乳酸菌非抗性表达载体的重组与表达,属于生物基因领域,其特征是:将克隆质粒和以thyA基因为选择压力的载体均以SacI、KpnI双酶切,纯化回收后,以T4 DNA连接酶连接,连接产物转化至thyA基因缺陷型的大肠杆菌感受态E.coli X13中,在培养基上培养,经生长功能弥补,筛选获得原核重组表达质粒;将阳性菌用苏氨酸诱导表达,重组质粒获得高效表达,融合蛋白的相对分子量约为44.88kD。有益效果是:VP6蛋白为RV组特异性抗原,位于病毒的内壳,占病毒颗粒的51%。由于VP6主要刺激机体产生黏膜免疫抗体sIgA,在黏膜免疫中具有非常重要的作用,因而研制轮状病毒Vp6基因介导黏膜免疫的口服基因工程疫苗具有重要的意义。
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