本实用新型公开了一种多层推送式微生物恒温药敏培养箱，包括恒温箱和输送箱，以及加热装置和控制系统，恒温箱内壁上、下端通过轴承安装有旋转装置的主体，旋转装置是由多层环形腔自上而下依次叠加固定形成的整体，每层环形腔又被支撑板均匀分割为多个沿径向的独立单元，每个独立单元分别编号后用于收纳匹配的培养盒；在中空腔内设置有内驱气缸机构。输送箱的外壳密封连接在所述进出口一侧的恒温箱侧壁上，输送箱内设置有外驱气缸机构和输送机构以及检测机构。本实用新型能够实现对任一培养盒的放入和提取操作。