L'invention a pour objet un de séparation sur support solide par rétention sélective séquentiel multicolonnes pour séparer un produit d'intérêt à partir d'une solution contenant un tel produit d'intérêt, par passage de cette solution sur un lit fixe de résine chromatographique et comprenant au moins trois zones, des moyens d'écoulement de liquide étant disposés entre des zones adjacentes et entre la dernière et la première zone, ce procédé comprenant plusieurs séquences, chaque séquence comprenant au moins une étape choisie parmi une étape d'adsorption, une étape de rinçage, une étape de désorption, mise en œuvre de façon simultanée ou non, chaque séquence suivante est effectuée par le déplacement des fronts dans les zones vers l'aval sensiblement d'un même incrément avant le déplacement périodique des points d'introduction et de soutirage caractérisé en ce que le procédé comprend une sous-séquence sans injection de la charge.