Procédé d'observation d'espèces biologiques (CB) sur un milieu de culture (MC) contenu dans un récipient présentant au moins une face translucide (CP, BU), le procédé comportant les étapes consistant à : a) diriger un faisceau lumineux (FL) sur une portion de ladite face translucide, de façon à définir au moins une région éclairée (M1 ) et au moins une région non éclairée (MO) de ladite face; et b) acquérir une image d'une portion (M2) de la surface dudit milieu de culture éclairée par ledit faisceau lumineux, l'acquisition étant réalisée à travers ladite ou au moins une dite région non éclairée (MO) de ladite face translucide et selon un axe optique d'acquisition formant un angle non nul (a) avec la direction de propagation dudit faisceau lumineux.