本发明公开了一种超临界二氧化碳流体中棉的酶退浆方法，属于纺织染整加工技术领域，为解决传统退浆工艺耗能大且不环保等问题而设计。酶退浆方法包括以下步骤：A、将适量表面活性剂溶于体积比为1:2-1:5的醇类和水的混合溶液中；B、将相对于待处理棉制品重量的0.1%-20%的退浆酶添加到混合溶液体系中，并搅拌至体系澄清，制得退浆工作液；C、将退浆工作液置于酶退浆装置的退浆液储存釜内，并将酶退浆装置置于带循环装置的超临界二氧化碳流体处理系统中；D、密闭系统后启动循环装置，在一定超临界流体条件下，退浆工作液对待处理棉制品的浆料进行酶解处理。本发明实现了棉制品在超临界二氧化碳流体中的酶退浆前处理，节能且环保。