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公开(公告)号：CN110669786A
公开(公告)日：2020-01-10
申请号：CN201911108222.4
申请日：2019-11-13
Applicant: 内蒙古农业大学
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种发根农杆菌介导的中间锦鸡儿毛状根遗传转化体系的建立及优化方法，选取生长良好的中间锦鸡儿幼苗，选取下胚轴较粗壮的植株进行注射农杆菌悬浮液进行侵染，侵染后选取中间锦鸡儿毛状根检测GUS基因表达情况。毛状根遗传转化体系使基因在中间锦鸡儿毛状根中过量表达，操作简单，表达水平高，可为开展基因功能验证和筛选功能基因提供技术支持；而且待毛状根长到一定大小后切除主根，这时毛状根取代主根成为该中间锦鸡儿植株的一部分及形成转基因毛状根与原植株茎叶的嵌合体，在研究基因功能时，由于植物是个有机的整体，在处理植物根部时，植物整个植株都可能会发生相关形态及生理生化变化，有利于在整体条件下研究基因功能。
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公开(公告)号：CN113652446A
公开(公告)日：2021-11-16
申请号：CN202111103769.2
申请日：2021-09-22
Applicant: 内蒙古农业大学
Abstract: 本发明公开了一种发根农杆菌介导的中间锦鸡儿毛状根一步转化方法，包括如下步骤：S1.将含有e‑GFP表达载体的质粒电转化进发根农杆菌K599感受态细胞中；S2.制备OD600nm为0.8～0.95的发根农杆菌菌悬液，并加入乙酰丁香酮；S3.培养侵染所用的细菌膏；S4.选取中间锦鸡儿幼苗，斜切幼苗子叶节下1cm处，弃去下部分，将切口进行侵染，然后将幼苗移栽回土中，给幼苗浇1/4B5培养基后，置于光照培养箱中进行培养。本发明通过一步法转化中间锦鸡儿毛状根使基因在毛状根中过量表达，相比于组培方法转化中间锦鸡儿毛状根，这种方法操作更加简单，不需要制备无菌苗，检测时间更短，基因表达水平高且检测方便。
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公开(公告)号：CN113652446B
公开(公告)日：2023-07-07
申请号：CN202111103769.2
申请日：2021-09-22
Applicant: 内蒙古农业大学
Abstract: 本发明公开了一种发根农杆菌介导的中间锦鸡儿毛状根一步转化方法，包括如下步骤：S1.将含有e‑GFP表达载体的质粒电转化进发根农杆菌K599感受态细胞中；S2.制备OD600nm为0.8～0.95的发根农杆菌菌悬液，并加入乙酰丁香酮；S3.培养侵染所用的细菌膏；S4.选取中间锦鸡儿幼苗，斜切幼苗子叶节下1cm处，弃去下部分，将切口进行侵染，然后将幼苗移栽回土中，给幼苗浇1/4B5培养基后，置于光照培养箱中进行培养。本发明通过一步法转化中间锦鸡儿毛状根使基因在毛状根中过量表达，相比于组培方法转化中间锦鸡儿毛状根，这种方法操作更加简单，不需要制备无菌苗，检测时间更短，基因表达水平高且检测方便。
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公开(公告)号：CN110669786B
公开(公告)日：2022-09-13
申请号：CN201911108222.4
申请日：2019-11-13
Applicant: 内蒙古农业大学
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种发根农杆菌介导的中间锦鸡儿毛状根遗传转化体系的建立及优化方法，选取生长良好的中间锦鸡儿幼苗，选取下胚轴较粗壮的植株进行注射农杆菌悬浮液进行侵染，侵染后选取中间锦鸡儿毛状根检测GUS基因表达情况。毛状根遗传转化体系使基因在中间锦鸡儿毛状根中过量表达，操作简单，表达水平高，可为开展基因功能验证和筛选功能基因提供技术支持；而且待毛状根长到一定大小后切除主根，这时毛状根取代主根成为该中间锦鸡儿植株的一部分及形成转基因毛状根与原植株茎叶的嵌合体，在研究基因功能时，由于植物是个有机的整体，在处理植物根部时，植物整个植株都可能会发生相关形态及生理生化变化，有利于在整体条件下研究基因功能。
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