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公开(公告)号：CN115404213A
公开(公告)日：2022-11-29
申请号：CN202211127778.X
申请日：2022-09-16
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本申请提供了一种肝脏淋巴管内皮细胞的分选方法、应用及试剂盒，方法包括：通过静脉向肝脏注射未标记的LYVE‑1抗体溶液，使未标记的LYVE‑1抗体与肝血窦内皮细胞的LYVE‑1抗原结合；从胆总管向肝脏高压注射已标记的LYVE‑1抗体溶液，已标记的LYVE‑1抗体溶液冲破胆管末端，使已标记的LYVE‑1抗体与肝脏淋巴管内皮细胞的LYVE‑1抗原结合；基于已标记的LYVE‑1抗体对肝脏进行细胞分选，获得肝脏淋巴管内皮细胞；应用本方法，可以提高分选前单细胞悬液中肝脏淋巴管内皮细胞的比例，从而减少流式分选的时间，考虑到流式细胞分选过程对细胞的影响，减少流式分选时间可以让分选的细胞具有更高的保真性，更有利于后续研究；此外，还有利于提高肝脏淋巴管内皮细胞的细胞得率。
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公开(公告)号：CN115531558B
公开(公告)日：2024-07-26
申请号：CN202211131799.9
申请日：2022-09-16
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本公开提供了一种动物肝脏淋巴管系统的标记和三维图谱成像方法，成像方法包括：向动物体内注射未标记的LYVE‑1抗体，以封闭肝血窦内皮细胞上的LYVE‑1抗原；向动物的胆总管注射标记的LYVE‑1抗体，以标记动物的肝脏淋巴管系统；对标记的动物肝脏淋巴管系统进行三维成像，得到肝脏淋巴管系统的三维图谱。本发明根据肝脏血管、淋巴管的空间位置差异，提出一种时空顺序注射不同抗体的方法来特异性标记小鼠完整肝脏的淋巴管系统，例如先注射未偶联荧光基团的LYVE‑1抗体，再向胆总管注射注射偶联荧光基团的LYVE‑1抗体，实现了单一荧光抗体特异性标记肝脏淋巴管系统；荧光显微成像的时候，只有肝脏淋巴管有荧光基团的信号，因此可以得到动物肝脏淋巴管系统的三维图谱。
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公开(公告)号：CN114076700B
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202010822495.1
申请日：2020-08-13
Applicant: 华中科技大学
IPC: G01N1/28
Abstract: 本发明提供了一种组织切片获取带有精准空间定位单细胞的方法，属于生物技术领域，包括：在组织切片的一面粘附透明胶带，组织切片经固定处理后，用另一层透明胶带覆盖组织切片的另一面，形成三层结构，然后用刻有方格矩阵的芯片在胶带上印上印记；将所述三层结构进行显微成像，获取细胞空间构架图；沿数个方向拉伸三层结构，拉伸后进行显微成像，获取拉伸后的细胞空间构架图；撕掉上层覆盖的透明胶带，从附带组织切片的透明胶带上获取单个目标细胞。该方法能够在获取完整单个细胞的同时，保留目标细胞的精准空间信息，适用动物组织目标细胞功能状态与细胞定位关系的研究。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111979306B
公开(公告)日：2022-06-24
申请号：CN201910428083.7
申请日：2019-05-22
Applicant: 华中科技大学
IPC: C12Q1/6869 , G01N1/28 , G01N1/42 , G01N21/64
Abstract: 本发明提供了一种适用于荧光成像与转录组测序的组织样本制备方法，所述方法包括：S1、将动物组织脱水后冷冻固定，然后切片；S2、向步骤S1所得组织切片上添加固定液，使组织切片完全被固定液浸润，固定结束后洗去组织切片表面固定液，即得适用于荧光成像与转录组测序的组织样本；所述固定液的配制方法包括：将3,3'‑二硫代二丙酸双(N‑羟基琥珀酰亚胺酯)溶解于DMSO中获得交联剂溶液，然后将交联剂溶液与无水乙醇、PBS缓冲液混合得到固定液。本发明还提供了与上述方法配套的试剂盒。本发明可同时保持动物组织切片的结构与细胞形态、荧光蛋白信号、单个细胞内RNA的完整性，与荧光成像技术和转录组技术兼容。
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公开(公告)号：CN114076700A
公开(公告)日：2022-02-22
申请号：CN202010822495.1
申请日：2020-08-13
Applicant: 华中科技大学
IPC: G01N1/28
Abstract: 本发明提供了一种组织切片获取带有精准空间定位单细胞的方法，属于生物技术领域，包括：在组织切片的一面粘附透明胶带，组织切片经固定处理后，用另一层透明胶带覆盖组织切片的另一面，形成三层结构，然后用刻有方格矩阵的芯片在胶带上印上印记；将所述三层结构进行显微成像，获取细胞空间构架图；沿数个方向拉伸三层结构，拉伸后进行显微成像，获取拉伸后的细胞空间构架图；撕掉上层覆盖的透明胶带，从附带组织切片的透明胶带上获取单个目标细胞。该方法能够在获取完整单个细胞的同时，保留目标细胞的精准空间信息，适用动物组织目标细胞功能状态与细胞定位关系的研究。
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公开(公告)号：CN111979306A
公开(公告)日：2020-11-24
申请号：CN201910428083.7
申请日：2019-05-22
Applicant: 华中科技大学
IPC: C12Q1/6869 , G01N1/28 , G01N1/42 , G01N21/64
Abstract: 本发明提供了一种适用于荧光成像与转录组测序的组织样本制备方法，所述方法包括：S1、将动物组织脱水后冷冻固定，然后切片；S2、向步骤S1所得组织切片上添加固定液，使组织切片完全被固定液浸润，固定结束后洗去组织切片表面固定液，即得适用于荧光成像与转录组测序的组织样本；所述固定液的配制方法包括：将3,3'-二硫代二丙酸双(N-羟基琥珀酰亚胺酯)溶解于DMSO中获得交联剂溶液，然后将交联剂溶液与无水乙醇、PBS缓冲液混合得到固定液。本发明还提供了与上述方法配套的试剂盒。本发明可同时保持动物组织切片的结构与细胞形态、荧光蛋白信号、单个细胞内RNA的完整性，与荧光成像技术和转录组技术兼容。
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公开(公告)号：CN115531558A
公开(公告)日：2022-12-30
申请号：CN202211131799.9
申请日：2022-09-16
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本公开提供了一种动物肝脏淋巴管系统的标记和三维图谱成像方法，成像方法包括：向动物体内注射未标记的LYVE‑1抗体，以封闭肝血窦内皮细胞上的LYVE‑1抗原；向动物的胆总管注射标记的LYVE‑1抗体，以标记动物的肝脏淋巴管系统；对标记的动物肝脏淋巴管系统进行三维成像，得到肝脏淋巴管系统的三维图谱。本发明根据肝脏血管、淋巴管的空间位置差异，提出一种时空顺序注射不同抗体的方法来特异性标记小鼠完整肝脏的淋巴管系统，例如先注射未偶联荧光基团的LYVE‑1抗体，再向胆总管注射注射偶联荧光基团的LYVE‑1抗体，实现了单一荧光抗体特异性标记肝脏淋巴管系统；荧光显微成像的时候，只有肝脏淋巴管有荧光基团的信号，因此可以得到动物肝脏淋巴管系统的三维图谱。
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公开(公告)号：CN207202857U
公开(公告)日：2018-04-10
申请号：CN201720020039.9
申请日：2017-01-09
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本实用新型提供了一种动物活体成像盒，所述成像盒包括：内部中空的盒体，所述盒体一侧设置有开口；盒盖，所述盒盖与所述盒体的开口配合，覆盖开口使得盒体封闭，所述盒盖上设置有与小动物腹窗适配的第一开孔；动物放置床体，所述动物放置床体位于盒体内部，所述动物放置床体与所述盒盖通过一高度可调的固定装置连接。本实用新型能借助弹簧的缓冲作用减小呼吸抖动的影响，同时非常方便快捷地固定小鼠，以及可便捷的调平腹窗窗口面，最大限度优化动物腹窗与显微镜镜头的匹配度，缩短活体成像前的准备时间；并且可实现成像过程中精准的体温维持。
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