公开(公告)号：CN116218893A

公开(公告)日：2023-06-06

申请号：CN202310295970.8

申请日：2023-03-24

申请人： 哈尔滨医科大学

发明人： 周春水 ,  林国超 ,  胡子琪 ,  章铭珠 ,  朴晟文 ,  范建坤 ,  柳继超 ,  刘鹏 ,  傅松滨 ,  孙文静 ,  邱晓红 ,  张金伟

IPC分类号： C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  C12N15/113

摘要： 本发明公开了一种通过体外扩增重组质粒在其编码基因上生成短片段串联重复序列的方法。本发明方法先以一条半重复单位单链起始引物引导重组质粒的起始PCR扩增，再以一对双拷贝互补引物对引导重组质粒的后续PCR扩增。本发明方法成功地在重组质粒的GPLD1及INPP4B基因上生成了短片段串联重复序列。本发明方法实施简便、无需复杂的克隆操作，阳性克隆比率高。所生成的串联重复序列具有如下特征：(1)重复单位方向一致、拷贝数可变。(2)重复单位连接区之间不存在碱基突变，不改变编码基因阅读框。本发明方法适合在重组质粒上的任意编码基因上生成短片段串联重复序列，为阐明串联重复序列与细胞衰老、肿瘤发生及多种神经退行性疾病的发病关系提供了新型研究工具。